簡(jiǎn)要描述:產(chǎn)品名稱(chēng):Beyotime RIPA裂解液(強(qiáng))產(chǎn)品貨號(hào):P0013B英文名稱(chēng):RIPA Lysis Buffer產(chǎn)品規(guī)格:100ml
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品名稱(chēng):Beyotime RIPA裂解液(強(qiáng))
產(chǎn)品貨號(hào):P0013B
英文名稱(chēng):RIPA Lysis Buffer
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
產(chǎn)品介紹:
碧云天生產(chǎn)的RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統(tǒng)的細(xì)胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用于常規(guī)的PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation,IP)、免疫共沉淀(co-IP)和ELISA等。
本產(chǎn)品可以用于動(dòng)物、植物的細(xì)胞或組織樣品,也可以用于真菌或細(xì)菌樣品。RIPA裂解液的配方有很多種,根據(jù)其裂解液的強(qiáng)度大致可以分為強(qiáng)、中、弱三類(lèi)。
RIPA裂解液(強(qiáng))的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% Triton X-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,以及sodium orthovanadate,sodium fluoride,EDTA,leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
產(chǎn)品應(yīng)用:
本產(chǎn)品可以用于動(dòng)物、植物的細(xì)胞或組織樣品,也可以用于真菌或細(xì)菌樣品的組織裂解。
產(chǎn)品使用說(shuō)明:
a.把組織切成細(xì)小的碎片。
b.融解RIPA裂解液,混勻。取適當(dāng)量的裂解液,在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF,使PMSF的最終濃度為1mM,或者根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要加入適當(dāng)?shù)纳鲜龅鞍酌噶姿崦敢种苿┗旌衔铩?/span>
c.按照每20毫克組織加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。)
d.用玻璃勻漿器勻漿,或使用碧云天生產(chǎn)的E6600 TissueMaster™手持式組織研磨儀研磨,直至充分裂解。也可以把組織樣品冷凍后液氮研磨,研磨充分后加入裂解液進(jìn)行裂解。
e.充分裂解后,10000-14000g離心3-5分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。每20mg凍存的小鼠肝臟組織用200微升本裂解液裂解后獲得的上清,其蛋白濃度約為15-25mg/ml,不同狀態(tài)的不同組織有所不同。
f.如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈vortex使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,不必使用勻漿器或研磨設(shè)備,缺點(diǎn)是不如勻漿或研磨那樣裂解得比較充分。
注:RIPA裂解液的裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正常現(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組DNA等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組DNA結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過(guò)超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。如果檢測(cè)一些常見(jiàn)的轉(zhuǎn)錄因子,例如NF-kappaB、p53等時(shí),通常不必進(jìn)行超聲處理,就可以檢測(cè)到這些轉(zhuǎn)錄因子。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1.特殊的抗氧化劑有效地抑制樣品在檢測(cè)過(guò)程中產(chǎn)生新的MDA,使檢測(cè)更加準(zhǔn)確。同時(shí)本檢測(cè)試劑盒在檢測(cè)過(guò)程中可以把部分MDA天然形成的聚丙二醛分解成MDA,使對(duì)脂質(zhì)氧化的測(cè)定更加準(zhǔn)確。
2.本試劑盒可以檢測(cè)低達(dá)1μM的MDA,也可檢測(cè)高達(dá)200μM的MDA在本試劑盒的檢測(cè)范圍內(nèi),可以直接用本試劑盒檢測(cè)血漿、血清、尿液樣品等。
保存條件:
-20℃保存,一年有效。
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱(chēng):Beyotime RIPA裂解液(強(qiáng))
產(chǎn)品貨號(hào):P0013B
關(guān)于公司:
Beyotime創(chuàng)辦于2001年。近20年來(lái)專(zhuān)注于自主研發(fā)和生產(chǎn)。2007年成立上海碧云天生物技術(shù)有限公司,為特新“小巨人"企業(yè),并進(jìn)一步入選第二批第一年建議支持的專(zhuān)精特新“小巨人"企業(yè), 也是G60科創(chuàng)走廊一類(lèi)重點(diǎn)扶持企業(yè)和上海市專(zhuān)精特新中小企業(yè)。江蘇碧云天為江蘇省優(yōu)良企業(yè),南通市雙創(chuàng)優(yōu)企。公司主要研發(fā)生產(chǎn)生物、醫(yī)學(xué)研究用試劑、試劑盒、消耗品和儀器設(shè)備。
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